HBA1C E RASTREABILIDADE NGSP/IFCC: O QUE GARANTE A COMPARABILIDADE DOS RESULTADOS

HBA1C E RASTREABILIDADE NGSP/IFCC: O QUE GARANTE A COMPARABILIDADE DOS RESULTADOS

Um resultado de HbA1c de 6,5% só tem valor clínico se representar a mesma coisa em São Paulo, em Niterói ou em Boston. É a rastreabilidade metrológica, organizada pelo NGSP e pela IFCC, que garante essa equivalência.

A hemoglobina glicada reflete a glicemia média das 8 a 12 semanas anteriores à coleta e ocupa papel central tanto no diagnóstico quanto no acompanhamento do diabetes. As diretrizes da American Diabetes Association adotam HbA1c igual ou superior a 6,5% (48 mmol/mol) como critério diagnóstico, desde que o exame seja feito por método certificado pelo NGSP e padronizado ao ensaio do estudo DCCT.

A exigência não é burocrática. No estudo UKPDS, que acompanhou 4.585 pessoas com diabetes tipo 2, cada redução de 1 ponto percentual na HbA1c média esteve associada a 37% menos complicações microvasculares e a 21% menos mortes relacionadas ao diabetes. Se dois métodos divergem em meio ponto percentual, o paciente pode ser classificado de forma diferente, ter o tratamento intensificado sem necessidade ou deixar de recebê-lo.

Como nasceu o NGSP

O NGSP surgiu em 1996 para resolver um problema concreto: os métodos de HbA1c davam resultados muito diferentes entre si, o que impedia relacionar o valor de um paciente às metas dos grandes estudos clínicos.

O ponto de partida foi o Diabetes Control and Complications Trial (DCCT), estudo de nove anos concluído em 1993. Ele demonstrou que o risco de surgimento e progressão das complicações crônicas do diabetes acompanha de perto o controle glicêmico medido pela HbA1c, e gerou um grande banco de dados ligando a HbA1c à glicemia média. O UKPDS reforçou essa relação no diabetes tipo 2. Faltava, porém, que os laboratórios do mundo real “falassem a mesma língua” desses estudos.

Em 1993, um subcomitê da American Association for Clinical Chemistry (AACC) propôs usar o próprio método do DCCT, uma cromatografia líquida de troca iônica (HPLC Bio-Rex 70), como referência provisória. Duas lições práticas moldaram o programa:

• Calibradores universais não bastavam: Materiais processados para calibração, controle e ensaios de proficiência podem se comportar de forma diferente de uma amostra real de paciente, o chamado efeito matriz.
• A padronização deveria ocorrer no fabricante: Por isso, a verificação passou a ser feita por comparação com amostras frescas de sangue total, e não apenas com materiais de referência.

O modelo foi inspirado na rede de laboratórios de referência para o colesterol, que já usava comparações de amostras divididas para dar rastreabilidade aos fabricantes.

IFCC: a âncora metrológica e a equação mestra

O NGSP resolveu a comparabilidade com o DCCT, mas seu método de referência, a cromatografia de troca iônica, não é totalmente específico para a molécula de HbA1c. A IFCC criou então um sistema de referência de ordem metrológica superior, hoje considerado a única âncora válida para a padronização mundial.

O grupo de trabalho da IFCC partiu de uma definição química precisa: HbA1c é a hemoglobina com glicose ligada de forma estável à valina N-terminal da cadeia beta. O método de referência digere a hemoglobina com uma enzima, separa os hexapeptídeos glicados e não glicados por HPLC e os quantifica por espectrometria de massas ou por eletroforese capilar. O sistema é calibrado com materiais primários de HbA1c e HbA0 purificados, e foi aprovado por votação das sociedades nacionais de química clínica em 2001.

Ao comparar a nova referência com os programas nacionais dos Estados Unidos, do Japão e da Suécia, o grupo encontrou diferenças sistemáticas, porém lineares, estáveis e reprodutíveis entre eles. Essa relação ficou conhecida como equação mestra:

HbA1c NGSP (%) = 0,915 × HbA1c IFCC (%) + 2,15

Na prática, o método IFCC gera valores 1,5 a 2,0 pontos percentuais abaixo dos valores NGSP quando ambos são expressos em porcentagem. Para evitar confusão com as metas já conhecidas, a IFCC adotou uma unidade diferente, o mmol/mol, que é a unidade do Sistema Internacional para esse analito.

Em 2007, um consenso entre ADA, EASD, IDF e IFCC definiu que os resultados devem ser relatados em unidades IFCC (mmol/mol) e em unidades NGSP derivadas (%), usando a equação mestra. O estudo ADAG, com 507 participantes de 10 centros, acrescentou uma terceira forma de expressão, a glicemia média estimada (eAG), calculada como eAG (mg/dL) = 28,7 × HbA1c (%) − 46,7.

Valores calculados pela equação mestra IFCC/NGSP e pela equação do estudo ADAG; limites clínicos conforme as diretrizes da ADA e da SBD.

Como a rastreabilidade chega ao resultado do paciente

O resultado liberado pelo laboratório está ligado, por uma cadeia ininterrupta de comparações, ao método de referência da IFCC e ao valor do DCCT. Cada elo tem um responsável e um critério de aprovação.

No topo está o método de referência da IFCC, executado por uma rede global que hoje conta com 15 laboratórios aprovados e um candidato. Essa rede fornece aos fabricantes calibradores e controles de sangue total congelado, além de um programa de certificação com 24 amostras.

Logo abaixo está a rede NGSP. O laboratório central (CPRL) ainda roda o método original do DCCT e é apoiado por um laboratório primário de reserva e 10 laboratórios secundários (SRLs) nos Estados Unidos, Holanda, Japão e China. Em 2024 e 2025, os coeficientes de variação mensais entre esses laboratórios ficaram abaixo de 1,5%. As duas redes trocam amostras duas vezes por ano para confirmar que a equação mestra continua estável.

A certificação do fabricante funciona assim:

1. O fabricante analisa 40 amostras de sangue total fresco ou fresco congelado em paralelo com um SRL.
2. Para ser aprovado, pelo menos 36 dos 40 resultados devem ficar a até ±5% do valor do SRL, critério em vigor desde janeiro de 2019.
3. O certificado vale por um ano e precisa ser renovado.
4. Laboratórios clínicos podem se certificar diretamente: o Nível II segue o mesmo critério dos fabricantes, e o Nível I exige 37 de 40 resultados dentro de ±5%, além de monitoramento trimestral.

A rastreabilidade ao DCCT vale apenas para amostras frescas ou frescas congeladas, e não para materiais processados. Por isso, o último elo, o ensaio de proficiência com sangue total, é tão importante: é ele que mostra se a calibração do fabricante se mantém na rotina do laboratório.

Para o laboratório brasileiro, a consequência prática é simples: um método com certificado NGSP vigente e calibradores rastreáveis à IFCC já traz consigo toda essa cadeia. Cabe ao laboratório preservá-la com controle interno, participação em ensaios de proficiência e atenção às trocas de lote.

O que os números mostram

A padronização funcionou: no ensaio de proficiência do College of American Pathologists (CAP) de 2025, de 96,8% a 98,8% dos laboratórios ficaram dentro do limite de ±6%, e o coeficiente de variação (CV) entre todos os métodos ficou entre 2,5% e 2,8%.

Erro máximo aceito em relação ao alvo NGSP no ensaio de proficiência com sangue total, nos anos em que o critério mudou. Fonte: NGSP, ata do Fórum de Fabricantes NGSP/IFCC, julho de 2025.

O CAP passou a avaliar a HbA1c pela exatidão em 2007, com alvos definidos pela rede NGSP e tolerância inicial de ±15%, que foi sendo reduzida ano a ano. Em 2009, o CV entre todos os métodos ainda era de cerca de 4,5%; desde 2020 ele se mantém abaixo de 3%. Hoje há mais de 400 métodos e cerca de 130 laboratórios certificados pelo NGSP no mundo.

Onde a rastreabilidade não alcança

Um método perfeitamente rastreável ainda pode gerar um resultado que não reflete a glicemia do paciente. Há dois tipos de problema, e é importante separá-los.

Interferência analítica, que depende do método. Variantes genéticas de hemoglobina, como os traços HbS e HbC, a hemoglobina fetal elevada e derivados quimicamente modificados, como a hemoglobina carbamilada da insuficiência renal, podem alterar a medida. O efeito varia conforme a variante e o método. Em ordem de prevalência mundial, as variantes mais comuns são HbS, HbE, HbC e HbD, todas com uma única troca de aminoácido na cadeia beta, e já foram descritas mais de 300 variantes raras dessa cadeia. Vale lembrar que a certificação do NGSP não inclui avaliação de interferências. Por isso o NGSP mantém uma tabela pública, método a método, e recomenda que o laboratório escolha seu ensaio considerando a população atendida.

Interferência biológica, que independe do método. Qualquer condição que encurte a sobrevida das hemácias ou reduza sua idade média, como hemólise ou recuperação de sangramento agudo, reduz falsamente a HbA1c. Outras situações merecem atenção:

• Anemia ferropriva está associada a HbA1c mais alta, e a reposição de ferro reduz o valor. Na gestação, a deficiência de ferro eleva a HbA1c no fim da gravidez.
• Doença renal crônica e diálise tornam a interpretação difícil, e a albumina glicada tende a ser um marcador mais robusto nesses pacientes.
• Doença falciforme e outras formas homozigóticas (HbSS, HbCC, HbSC) exigem cautela por causa da anemia, da renovação acelerada das hemácias e das transfusões. Nesses casos, frutosamina ou albumina glicada são alternativas.

Esse ponto é especialmente relevante no Brasil. Dados da triagem neonatal indicam que cerca de 1 em cada 35 nascidos vivos tem traço falciforme, proporção que chega a 1 em 17 na Bahia e 1 em 21 no Rio de Janeiro. Um resultado discordante da glicemia de jejum, da curva glicêmica ou do monitoramento contínuo deve levar à investigação de variantes antes de qualquer mudança de conduta.

O cenário brasileiro e o que fazer na prática

No Brasil, a recomendação é a mesma das diretrizes internacionais: usar métodos certificados pelo NGSP. A Sociedade Brasileira de Diabetes afirma que essa é a condição para a comparabilidade entre dosagens, adota HbA1c abaixo de 5,7% como faixa de normalidade e recomenda meta inferior a 7,0% para a maioria das pessoas com diabetes. Desde 2004, o posicionamento do Grupo Interdisciplinar de Padronização da Hemoglobina Glicada também orienta o uso de métodos rastreáveis ao DCCT e a participação regular em ensaios de proficiência específicos para HbA1c.

Para o laboratório clínico, cinco cuidados mantêm a cadeia de rastreabilidade intacta:

1. Confirmar que o método tem certificado NGSP vigente, já que ele vale por um ano. A lista é pública e atualizada no site do programa.
2. Verificar na bula e na tabela do NGSP como o método se comporta frente às variantes HbS, HbC, HbE e HbD e à HbF elevada, considerando o perfil da população atendida.
3. Participar de ensaios de proficiência para HbA1c, de preferência com materiais comutáveis, e acompanhar o próprio viés em relação ao valor-alvo.
4. Monitorar o controle interno com atenção às trocas de lote de reagente e calibrador.
5. Comunicar ao médico quando o cromatograma ou o ensaio sugerirem variante de hemoglobina, e não liberar um valor que o método não consegue quantificar com segurança.

A comparabilidade da HbA1c não é um acaso, e sim o resultado de três décadas de trabalho coordenado. O DCCT e o UKPDS deram significado clínico ao número; o NGSP garantiu que laboratórios de todo o mundo reproduzissem esse número; e a IFCC ancorou o sistema em uma definição química precisa, rastreável ao Sistema Internacional de Unidades.

O resultado aparece nos dados: limites de proficiência que caíram de ±15% para ±6% e variação entre métodos abaixo de 3%. Ainda assim, a qualidade final depende de escolhas feitas na ponta: um método certificado e livre de interferências relevantes, um laboratório que monitora seu desempenho e profissionais que sabem quando desconfiar de um resultado. Quando esses elos funcionam juntos, um 6,5% significa exatamente 6,5%, para qualquer paciente, em qualquer lugar.

Referências

AMERICAN DIABETES ASSOCIATION. 2. Diagnosis and classification of diabetes: Standards of Care in Diabetes 2024. Diabetes Care, v. 47, supl. 1, p. S20-S42, 2024. DOI: 10.2337/dc24-S002.

BRASIL. Ministério da Saúde. Secretaria de Atenção à Saúde. Nota Técnica nº 035/2011/CGSH/DAE/SAS/MS. Brasília: Ministério da Saúde, 2011.

CONSENSUS COMMITTEE. Consensus statement on the worldwide standardization of the hemoglobin A1C measurement: the American Diabetes Association, European Association for the Study of Diabetes, International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, and the International Diabetes Federation. Diabetes Care, v. 30, n. 9, p. 2399-2400, 2007. DOI: 10.2337/dc07-9925.

HOELZEL, W. et al. IFCC reference system for measurement of hemoglobin A1c in human blood and the national standardization schemes in the United States, Japan, and Sweden: a method-comparison study. Clinical Chemistry, v. 50, n. 1, p. 166-174, 2004. DOI: 10.1373/clinchem.2003.024802.

JEPPSSON, J. O. et al. Approved IFCC reference method for the measurement of HbA1c in human blood. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, v. 40, n. 1, p. 78-89, 2002. DOI: 10.1515/CCLM.2002.016.

JOHN, W. G. et al. HbA1c standardisation: history, science and politics. The Clinical Biochemist Reviews, v. 28, n. 4, p. 163-168, 2007. Disponível em: https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC2282401/. Acesso em: 4 nov. 2026.

LENTERS-WESTRA, E. et al. Challenges in Hb A1c point-of-care testing: only 5 of 19 Hb A1c point-of-care devices meet IFCC and NGSP certification criteria on independent evaluation. Clinical Chemistry, v. 71, n. 7, p. 775-788, 2025. DOI: 10.1093/clinchem/hvaf059.

LITTLE, R. R. et al. Effects of 49 different rare Hb variants on HbA1c measurement in eight methods. Journal of Diabetes Science and Technology, v. 9, n. 4, p. 849-856, 2015.

LITTLE, R. R.; ROBERTS, W. L. A review of variant hemoglobins interfering with hemoglobin A1c measurement. Journal of Diabetes Science and Technology, v. 3, n. 3, p. 446-451, 2009.

LITTLE, R. R.; ROHLFING, C. L.; SACKS, D. B. Status of hemoglobin A1c measurement and goals for improvement: from chaos to order for improving diabetes care. Clinical Chemistry, v. 57, n. 2, p. 205-214, 2011. DOI: 10.1373/clinchem.2010.148841.

LITTLE, R. R.; ROHLFING, C.; SACKS, D. B. The National Glycohemoglobin Standardization Program: over 20 years of improving hemoglobin A1c measurement. Clinical Chemistry, v. 65, n. 7, p. 839-848, 2019. DOI: 10.1373/clinchem.2018.296962.

NATHAN, D. M. et al. Translating the A1C assay into estimated average glucose values. Diabetes Care, v. 31, n. 8, p. 1473-1478, 2008. DOI: 10.2337/dc08-0545.

NGSP. Background. [S. l.], [s.d.]a. Disponível em: https://ngsp.org/bground.asp. Acesso em: 4 nov. 2026.

NGSP. NGSP protocol: certification. [S. l.], [s.d.]b. Disponível em: https://ngsp.org/protcert.asp. Acesso em: 4 nov. 2026.

NGSP. Summer 2009 meetings. [S. l.], 2009. Disponível em: https://ngsp.org/SC2009.asp. Acesso em: 4 nov. 2026.

NGSP. Minutes of the NGSP/IFCC Manufacturer Forum. [S. l.], 2015. Disponível em: https://ngsp.org/docs/MF2015.pdf. Acesso em: 4 nov. 2026.

NGSP. Minutes of the NGSP Clinical Advisory Committee meeting. [S. l.], 2024a. Disponível em: https://ngsp.org/docs/CAC2024.pdf. Acesso em: 4 nov. 2026.

NGSP. Factors that interfere with HbA1c test results. [S. l.], atualizado em 21 nov. 2024b. Disponível em: https://ngsp.org/factors.asp. Acesso em: 4 nov. 2026.

NGSP. Minutes of the NGSP/IFCC Manufacturer Forum. Chicago, 28 jul. 2025. Disponível em: https://ngsp.org/docs/MF2025.pdf. Acesso em: 4 nov. 2026.

NORDIN, G.; DYBKAER, R. Recommendation for term and measurement unit for “HbA1c”. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, v. 45, n. 8, p. 1081-1082, 2007. DOI: 10.1515/CCLM.2007.245.

PIMAZONI NETTO, A. et al. Atualização sobre hemoglobina glicada (HbA1C) para avaliação do controle glicêmico e para o diagnóstico do diabetes: aspectos clínicos e laboratoriais. Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial, v. 45, n. 1, p. 31-48, 2009.

PITITTO, B. A. et al. Metas no tratamento do diabetes. In: BERTOLUCI, M. (ed.). Diretriz da Sociedade Brasileira de Diabetes. Ed. 2024. São Paulo: Sociedade Brasileira de Diabetes, 2024. DOI: 10.29327/557753.2022-3. Disponível em: https://diretriz.diabetes.org.br/metas-no-tratamento-do-diabetes/. Acesso em: 4 nov. 2026.

STRATTON, I. M. et al. Association of glycaemia with macrovascular and microvascular complications of type 2 diabetes (UKPDS 35): prospective observational study. BMJ, v. 321, n. 7258, p. 405-412, 2000. DOI: 10.1136/bmj.321.7258.405.

SUMITA, N. M.; ANDRIOLO, A. Importância da hemoglobina glicada no controle do diabetes mellitus e na avaliação de risco das complicações crônicas. Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial, v. 44, n. 3, p. 169-174, 2008.